Анализ генома. Методы
Автор(ы): | Дейвис К.
06.10.2007
|
Год изд.: | 1990 |
Описание: | "Сборник молекулярно-биологических методов, используемых при изучении генома человека, написанный коллективом авторов из США и Великобритании. Изложению каждого метода предшедствует краткое теоретическое введение, что делает книгу доступной для начинающих исследователей. Описаны методы трансфекции эукариотических клеток". |
Оглавление: |
Обложка книги.
От редакции [5]Предисловие [6] Список сокращений [7] Глава 1. Методы переноса генетического материала в клетки млекопитающих. П. Гудфеллоу, К. Притчард, Г. Бантинг [8] 1. Введение [8] 2. Общие положения [10] 2.1. Необходимые условия [10] 2.2. Селекция [11] 3. Слияние целых клеток [13] 3.1. Введение [13] 3.2. Получение клеточных гибридов с помощью слияния, индуцированного ПЭГ (основная методика) [13] 3.3. Возможные ошибки и варианты [14] 4. Перенос генов с помощью мини-клеток (MMGT) [16] 4.1. Введение [16] 4.2. Метод MMGT [17] 4.3. Очистка мини-клеток [20] 4.4. Возможные ошибки и варианты методики [21] 5. Перенос генов, опосредованный хромосомами (CMGT) [22] 5.1. Введение [22] 5.2. Выделение хромосом [23] 5.3. Перенос хромосом [24] 5.4. Предварительная селекция [25] 5.5. Возможные ошибки и варианты методики [25] 6. Перенос генов, опосредованный ДНК [26] 6.1. Введение [26] 6.2. Транфекция ДНК с использованием фосфата кальция [27] 6.3. Совместный перенос (котраинфекция) и предварительная селекция [28] 6.4. Возможные ошибки и варианты методики [28] 7. Заключение [29] Литература [29] Глава 2. Рестрикциоиное картирование. А. Колсон, Дж. Салстон [31] 1. Введение [31] 2. Стратегия [31] 2.1. Сравнение клонов [31] 2.2. Векторы [32] 2.3. Селекция клонов [33] 3. Экспериментальная часть [33] 3.1. Создание библиотеки [33] 3.2. Анализ клонов [37] 3.3. Обработка результатов [46] 3.4. Окончательное заполнение карты (закрытие карты) [50] 4. Заключение [55] 4.1. Карта С. elegans [55] 4.2. Картирование других организмов [55] 5. Прописи растворов [56] Литература [57] Глава 3. Пульс-электрофорез и методы работы с большими молекулами ДНК. К. Смит, С. Клко, Ч. Кантор [58] 1. Введение [58] 2. Приготовление образцов ДНК [58] 2.1. Приготовление вставок с образцами ДНК простейших [67] 2.2. Выделение ДНК из культивируемых клеток и лимфоцитов [68] 2.3. Выделение ДНК из клеток прокариот [68] 2.4. Выделение ДНК из клеток грибов [69] 2.5. Выделение ДНК из растительных клеток [69] 3. Работа с агарозными блок-вставками, содержащими образцы ДНК [70] 3.1. Ферментативная обработка [70] 4. Пульс-электрофорез (ПЭФ) [71] 4.1. Заливка геля и нанесение образцов [72] 4.2. Подбор эффективных условий разделения [74] 5. Фотографирование, блотинг и гибридизация [78] 5.1. Фотографирование и блотинг [79] 5.2. Гибридизация [80] 6. Приложение [81] Литература [93] Глава 4. Прыжки по хромосоме. Ф. Коллинз [95] 1. Введение [95] 2. Область применения метода [96] 3. Стандартные библиотеки «прыжков» [98] 3.1. Типы «прыжков» [98] 3.2. Принцип создания стандартных библиотек [99] 3.3. Получение ДНК-фрагментов желаемого размера [101] 3.4. Циклизация [104] 3.5. Клонирование и скрининг [108] 3.6. Анализ клонов [111] 3.7. Последовательные «прыжки» [113] 4. Специфические библиотеки «прыжков» [114] 4.1. Принцип метода [114] 4.2. Методика создания библиотеки [114] 5. Библиотеки клонов-связок [116] 5.1. Принцип конструирования [116] 5.2. Методика получения NotI -библиотеки илонов-связок [116] 5.3. Использование ДНК из сортированных хромосом [118] 6. Возможные усовершенствования [118] Литература [121] Глава 5. Обнаружение единичных иуклеотидных замен в ДНК: расщепление РНКазой и денатурирующий градиентный гель-электрофорез. Р. Майерс, В. Шеффилд, Д. Кокс [123] 1. Введение [123] 2. Общее описание методов [124] 2.1. РНКазное расщепление [124] 2.2. Денатурирующий градиентный гель-электрофорез [128] 2.3. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) [138] 3. Предварительные процедуры [141] 4. Полимеразная цепная реакция [141] 4.1. Материалы [142] 4.2. Методы [143] 5. Метод РНКазного расщепления [144] 5.1. Материалы [145] 5.2. Методы [149] 6. Денатурирующий градиентный гель-электрофорез [153] 6.1. Гель-электрофоретическая система [153] 6.2. Подготовительные эксперименты: перпендикулярно-градиентный и оптимизирующий электрофорезы [159] 6.3. Приготовление зондов для анализа при помощи ДГГЭ [166] 6.4. Обнаружение единичных нуклеотидных замен при помощи денатурирующего градиентного гель-электрофореза [173] Литература [174] Глава 6. Полимеразная цепная реакция. Р. Сайки, У. Гиленстен, Г. Эрлих [176] 1. Введение [176] 2. Основные методики [178] 2.1. Оборудование [178] 2.2. Компоненты реакции [179] 2.3. Параметры температурных циклов [180] 3. Амплификация геномной последовательности «вручную» [182] 4. Прямое секвенирование амплифицированных фрагментов ДНК [184] 4.1. Секвенирование двухцепочечных образцов [186] 4.2. Секвенирование одноцепочечных фрагментов ДНК [186] 5. Заключение [189] Литература [189] Глава 7. Геномная дактилоскопия. Р. Уэллс [191] 1. Введение [191] 2. Гибридизационные зонды для геномной дактилоскопии [192] 2.1. Зонды на основе минисателлитов [192] 2.2. М13 [196] 3. Гель-электрофорез и перенос ДНК [199] 3.1. Выбор фермента рестрикции [199] 3.2. Приготовление образцов ДНК для электрофореза [200] 3.3. Условия электрофореза [200] 3.4. Перенос по Саузерну [201] 4. Условия гибридизации и отмывки фильтров [201] 4.1. Минисателлиты [202] 4.2. Метод геномной дактилоскопии с использованием М13 [203] 4.3. Радиоавтография [203] 4.4. Удаление проб с найлоновых фильтров [204] 5. Использование метода геномной дактилоскопии в анализе генетического сцепления [204] 5.1. Обоснование метода [204] 5.2. Статистические расчеты [206] 5.3. Практические аспекты сегрегационного анализа [208] 6. Другие применения метода геномных отпечатков [210] 6.1. Определение структуры родословной [210] 6.2. Сравнения в пределах одного организма [212] Литература [212] Глава 8 Картирование сложно наследуемых признаков человека. Э. Ландер [214] 1. Введение [214] 2. Основы анализа сцепления [216] 3. Карта генетического сцепления генома человека [218] 4. Планирование анализа сцепления для болезней с простым типом наследования [219] 5. Осложнения: неполная пенетрантность и ошибки клинической диагностики [220] 6. Осложнения: генетическая гетерогенность и фенокопии [224] 7. Осложнения: генетические взаимодействия [231] 8. Полигенное наследование [233] 9. Картирование редких рецессивных признаков [234] 10. Заключение [235] Литература [237] Предметный указатель [240] Указатель латинских названий [243] |
Формат: | djvu |
Размер: | 3988679 байт |
Язык: | RUS |
Рейтинг: | 150 |
Открыть: | Ссылка (RU) |