Молекулярная биотехнология. Принципы и применение
Автор(ы): | Глик Б., Пастернак Дж.
06.10.2007
|
Год изд.: | 2002 |
Описание: | Перед вами современное руководство по биотехнологии, написанное авторитетными канадскими учеными. В книге подробно изложены основы генной инженерии: механизмы репликации, транскрипции и трансляции; методы клонирования, амплификации и секвенирования ДНК; конструирование рекомбинантных ДНК; введение последовательностей-мишеней в геном микроорганизмов, растений и животных, а также практическое применение генной инженерии для получения лекарственных веществ, вакцин, факторов роста, инсектицидов и т.д. Большое внимание уделено генной терапии и связанным с ней морально-этическим проблемам, патентованию биотехнологических продуктов и способов их получения. Книга предназначена для студентов университетов, сельскохозяйственных и медицинских институтов, а также для научных работников и специалистов по биотехнологии. |
Оглавление: |
Обложка книги.
От редактора перевода [5]Предисловие [7] Предисловие к первому изданию [9] ЧАСТЬ I ОСНОВЫ МОЛЕКУЛЯРНОЙ БИОТЕХНОЛОГИИ [13] Глава 1. Молекулярно-биотехнологическая революция [15] Технология рекомбинантных ДНК [15] Возникновение молекулярной биотехнологии [16] Коммерциализация молекулярной биотехнологии [19] Надежды и опасения [20] Заключение [22] Литература [23] Контрольные вопросы [23] Глава 2. Биологические системы, использующиеся в молекулярной биотехнологии [24] Прокариоты и эукариоты [24] Escherichia coli [24] Saccharomyces cerevisiae [27] Культуры эукариотических клеток [27] Заключение [28] Литература [28] Контрольные вопросы [28] Глава 3. ДНК, РНК и синтез белка [29] Структура ДНК [29] Репликация [32] Расшифровка генетической информации: РНК и белок [33] Трансляция [38] Регуляция транскрипции у бактерий [41] Регуляция транскрипции у эукариот [45] Заключение [47] Литература [49] Контрольные вопросы [49] Глава 4. Технология рекомбинантных ДНК [50] Рестрицирующие эндонуклеазы [50] Плазмидные векторы [56] Плазмидный вектор pBR322 [58] Трансформация и отбор [58] Другие плазмидные векторы [60] Создание и скрининг библиотек [62] Создание геномной библиотеки [62] Скрининг с помощью гибридизации [64] Иммунологический скрининг [67] Скрининг по активности белка [69] Клонирование структурных генов эукариот [70] Векторы для клонирования крупных фрагментов ДНК [71] Векторы на основе бактериофага (?) [71] Космиды [74] Векторные системы для клонирования очень крупных фрагментов ДНК [76] Генетическая трансформация прокариот [76] Перенос ДНК в Е. coli [76] Электропорация [76] Конъюгация [77] Заключение [77] Литература [78] Контрольные вопросы [79] Глава 5. Химический синтез, определение нуклеотидной последовательности и амплификация ДНК [80] Химический синтез ДНК [80] Фосфорамидитный метод [80] Применение синтезированных олигонуклеотидов [85] Синтез генов [86] Методы секвенирования ДНК [88] Дидезоксинуклеотидный метод секвенирования ДНК [89] Секвенирование ДНК с помощью вектора на основе фага М13 [91] Праймер-опосредованная прогулка [93] Полимеразная цепная реакция [94] Получение с помошью ПЦР кДНК, отвечающих концам молекул мРНК [98] Синтез генов с помощью ПЦР [102] Заключение [102] Литература [103] Контрольные вопросы [104] Глава 6. Оптимизация экспрессии генов, клонированных в прокариотических системах [105] Экспрессия генов при участии сильных регулируемых промоторов [105] Регулируемые промоторы [107] Получение больших количеств белковых продуктов [108] Крупномасштабные системы [109] Использование для экспрессии других микроорганизмов [111] Химерные белки [112] Расщепление химерных белков [112] Применение химерных белков [113] Включение белков в поверхностные структуры [115] Однонаправленное тандемное расположение генов [117] Трансляционные экспрессирующие векторы [118] Стабилизация белков [121] Рост в условиях недостатка кислорода [122] Применение хозяйских штаммов с дефицитом протеиназ [122] Бактериальный «гемоглобин» [122] Интеграция чужеродной ДНК в хромосому хозяина [123] Повышение эффективности секреции [126] Метаболическая перегрузка [127] Заключение [130] Литература [131] Контрольные вопросы [133] Глава 7. Получение рекомбинантных белков с помощью эукариотических систем [135] Системы экспрессии Saccharomyces сеrеvisiae [136] Векторы для S. cerevisiae [137] Прямая экспрессия в S. cerevisiae [137] Секреция гетерологичных белков, синтезируемых S. cerevisiae [139] Другие дрожжевые системы экспрессии [140] Синтез поверхностного антигена вируса гепатита В [141] Синтез бычьего лизоцима С2 [142] Системы экспрессии с использованием культур клеток насекомых [143] Система экспрессируюших векторов на основе бакуловирусов [144] Получение рекомбинантных бакуловирусов [145] Создание челночного вектора на основе бакуловирусов для Е. coli и клеток насекомых [146] Выделение рекомбинантного белка из клеток насекомых с помощью аффинного связывания [149] Экспрессирующие векторы для работы с клетками млекопитающих [149] Селективные маркерные гены [150] Экспрессия двух клонированных генов в одной клетке млекопитающих [151] Заключение [154] Литература [155] Контрольные вопросы [156] Глава 8. Направленный мутагенез и генная инженерия белков [158] Направленный мутагенез: методика [158] Олигонуклеотид-направленный мутагенез с использованием ДНК фага М13 [159] Олигонуклеотид-направленный мутагенез с использованием плазмидной ДНК [161] Олигонуклеотид-направленный мутагенез с использованием ПЦР-амплификации [163] Случайный мутагенез с использованием «вырожденных» олигонуклеотидных праймеров [163] Случайный мутагенез с использованием аналогов нуклеотидов [166] Генная инженерия белков [168] Образование дополнительных дисульфидных связей [168] Замена аспарагина на другие аминокислоты [170] Уменьшение числа свободных сульфгидрильных групп [170] Повышение ферментативной активности [171] Изменение потребности ферментов в металлических кофакторах [172] Изменение специфичности фермента [173] Повышение стабильности и специфичности фермента [174] Заключение [175] Литература [175] Контрольные вопросы [176] ЧАСТЬ II МОЛЕКУЛЯРНАЯ БИОТЕХНОЛОГИЯ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИХ СИСТЕМ [179] Глава 9. Молекулярная диагностика [181] Методы иммунодиагностики [182] Ферментный иммуносорбентный анализ [182] Моноклональные антитела [184] Образование и отбор гибридных клеток [185] Идентификация гибридных клеточных линий, секретирующих специфические антитела [185] Системы ДНК-диагностики [187] Гибридизационные зонды [188] Диагностика малярии [188] Выявление Trypanosoma cruzi [189] Нерадиоактивные методы детекции [190] Геномная дактилоскопия [192] Использование полиморфных ДНК-маркеров [194] Молекулярная диагностика генетических заболеваний [195] Серповидноклеточная анемия [195] Метод ПЦР/ЛОЗ [196] Генотипирование с использованием флуоресцентно меченных ПЦР-праймеров [198] Мутации в разных сайтах одного гена [199] Перспективы [201] Заключение [201] Литература [202] Контрольные вопросы [203] Глава 10. Микробиологическое производство лекарственных средств [204] Лекарственные препараты [204] Выделение кДНК интерферонов [204] Интерфероны человека, полученные методом генной инженерии [207] Гормон роста человека, полученный методом генной инженерии [208] Оптимизация генной экспрессии [208] Ферменты [209] ДНКаза I [209] Альгинат-лиаза [209] Моноклональные антитела как лекарственные средства [210] Структура и функции антител [211] Профилактика отторжения трансплантированных органов [212] Лекарственные вещества, связанные с моноклональными антителами [212] Моноклональные антитела человека [214] Гибридные моноклональные антитела человека и мыши [215] Производство антител с помощью Е. coli [218] Лекарственные средства против ВИЧ [222] Заключение [224] Литература [224] Контрольные вопросы [226] Глава 11. Вакцины [227] Субъединичные вакцины [228] Противогерпетические вакцины [230] Противоящурные вакцины [230] Противотуберкулезные вакцины [231] Пептидные вакцины [231] Генная иммунизация [233] Аттенуированные вакцины [234] Противохолерные вакцины [235] Противосальмонеллезные вакцины [236] Противолейшманиозные вакцины [237] «Векторные» вакцины [238] Противовирусные вакцины [238] Противобактериальные вакцины [242] Бактерии как системы доставки антигенов [242] Заключение [243] Литература [244] Контрольные вопросы [246] Глава 12. Использование рекомбинантных микроорганизмов для получения коммерческих продуктов [247] Эндонуклеазы рестрикции [247] Малые биологические молекулы [250] Синтез L-аскорбиновой кислоты [250] Синтез индиго [252] Синтез аминокислот [255] Антибиотики [257] Клонирование генов биосинтеза антибиотиков [259] Синтез новых антибиотиков [259] Разработка новых методов получения поликетидных антибиотиков [260] Усовершенствование производства антибиотиков [263] Биополимеры [266] Создание рекомбинантной бактерии Xanthomonas campestris с целью получения ксантановой слизи [266] Выделение генов биосинтеза меланина [267] Микробиологический синтез животного биополимера с адгезивными свойствами [268] Микробиологический синтез каучука [270] Микробиологический синтез полигидроксиалканоатов [270] Заключение [272] Литература [272] Контрольные вопросы [274] Глава 13. Биодеградация токсичных соединений и утилизация биомассы [275] Деградация ксенобиотиков с помощью микроорганизмов [275] Метаболические пути биодеградации ксенобиотиков, созданные методами генной инженерии [276] Перенос плазмид [276] Изменение генов [281] Утилизация крахмала и сахаров [286] Промышленное производство фруктозы и этанола [287] Повышение эффективности производства фруктозы и этанола [289] Zymomonas mobilis [292] Получение силоса [294] Утилизация целлюлозы [294] Компоненты лигноцеллюлозы [294] Выделение прокариотических целлюлазных генов [296] Выделение эукариотических целлюлазных генов [298] Манипуляции с целлюлазными генами [300] Белок одноклеточных организмов [301] Заключение [302] Литература [303] Контрольные вопросы [305] Глава 14. Бактерии, стимулирующие рост растений [306] Фиксация азота [306] Нитрогеназа [308] Компоненты [308] Генная инженерия кластера генов нитрогеназы [310] Гидрогеназа [313] Метаболизм водорода [313] Модификация генов гидрогеназ [314] Образование клубеньков [316] Конкуренция среди организмов, образующих клубеньки [316] Манипуляции с генами образования клубеньков [316] Биоконтроль патогенных микроорганизмов [320] Сидерофоры [321] Антибиотики [322] Ферменты [323] Образование кристаллов льда и антифризные белки [325] Стимуляция роста растений свободноживущими бактериями [326] Заключение [327] Литература [328] Контрольные вопросы [330] Глава 15. Микробные инсектициды [331] Токсин, синтезируемый Bacillus thuringiensis [332] Механизм действия и использование [332] Идентификация генов токсинов [335] Генная инженерия генов токсинов В. thuringiensis [336] Бакуловирусы как инструмент биоконтроля [342] Механизм действия [342] Усиление биоконтроля с помощью генной инженерии [343] Заключение [344] Литература [345] Контрольные вопросы [347] Глава 16. Промышленный синтез белков при участии рекомбинантных микроорганизмов [349] Рост микроорганизмов [350] Периодическая культура [351] Периодическая культура с добавлением субстрата [352] Непрерывная культура [353] Повышение эффективности ферментации [354] Культуры с высокой плотностью [356] Биореакторы [357] Типичные курпномасштабные системы ферментации [359] Двухступенчатая ферментация в тандемных эрлифтных биореакторах [360] Двухступенчатая ферментация в одном реакторе с механическим перемешиванием [362] Периодическая ферментация и периодическая ферментация с добавлением субстрата [363] Сбор клеток [363] Разрушение клеток [365] Дальнейшая обработка [366] Солюбилизация белков [367] Заключение [367] Литература [368] Контрольные вопросы [369] ЧАСТЬ III ЭУКАРИОТИЧЕСКИЕ СИСТЕМЫ [371] Глава 17. Генная инженерия растений: методология [373] Трансформация растений Ti-плазмидой из Agrobacterium tumefaciens [373] Векторные системы на основе Ti-плазмид [377] Физические методы переноса генов в растительные клетки [379] Бомбардировка микрочастицами [380] Применение репортерных генов при трансформации клеток растений [381] Эксперименты по экспрессии чужеродных генов в растениях [382] Выделение различных промоторов и их использование [383] Введение чужеродных генов в хлоропластную ДНК [384] Получение трансгенных растений, не содержащих маркерных генов [386] Заключение [386] Литература [387] Контрольные вопросы [388] Глава 18. Генная инженерия растений: применение [389] Выведение растений, устойчивых к насекомым-вредителям, вирусам и гербицидам [389] Растения, устойчивые к насекомым-вредителям [389] Растения, устойчивые к вирусам [395] Растения, устойчивые к гербицидам [400] Растения, устойчивые к грибам и бактериям [401] Получение растений, противостоящих неблагоприятным воздействиям и старению [403] Окислительный стресс [403] Солевой стресс [404] Созревание плодов [405] Изменение окраски цветков [406] Изменение пищевой ценности растений [407] Аминокислоты [408] Липиды [408] Изменение вкуса и внешнего вида плодов [410] Изменение внешнего вида [410] Изменение вкуса [411] Растения как биореакторы [412] Антитела [412] Полимеры [412] Чужеродные белки, аккумулирующиеся в семенах [413] Заключение [413] Литература [413] Контрольные вопросы [416] Глава 19. Трансгенные животные [418] Трансгенные мыши: методология [419] Использование ретровирусных векторов [419] Метод микроинъекций ДНК [420] Использование модифицированных эмбриональных стволовых клеток [422] Клонирование с помошью переноса ядра [426] Перенос генов с помощью искусственных дрожжевых хромосом [428] Трансгенные мыши: применение [430] Трансгенный крупный рогатый скот [433] Трансгенные овцы, козы и свиньи [435] Трансгенные птицы [436] Трансгенные рыбы [438] Заключение [439] Литература [439] Контрольные вопросы [441] Глава 20. Молекулярная генетика человека [442] Генетическое сцепление и картирование генов [444] Обнаружение и оценка генетического сцепления у человека [446] Анализ сцепления методом максимального правдоподобия: логарифм соотношения шансов (лод-балл) [447] Построение генетических карт хромосом человека [450] Генетический полиморфизм [450] Полиморфизм длины рестрикционных фрагментов [451] Полиморфизм коротких тандемных повторов [454] Картирование локуса генетического заболевания в определенном районе хромосомы [456] Построение мультилокусных хромосомных карт человека [459] Локализация гена заболевания на карте сцепления [460] Картирование с использованием радиационных гибридов [460] Физическое картирование генома человека [462] Построение контигов из YAC-, ВАС- и РАС-библиотек [462] Построение контигов из космидных, Р1- и (?)-библиотек [463] Транскрипционное картирование [465] Клонирование генов заболеваний человека [467] Выявление мутаций в генах человека [467] Функциональное картирование [468] Кандидатное картирование [469] Позиционное картирование [469] Позиционно-кандидатное картирование [476] Программа «Геном человека» [477] Заключение [479] Литература [481] Контрольные вопросы [482] Глава 21. Генная терапия [483] Генная терапия ex vivo [487] Генная терапия in vivo [493] Вирусные системы доставки генов [493] Ретровирусные векторы [493] Аденовирусные векторы [494] Векторы на основе аденоассоциированных вирусов [496] Векторы на основе вируса простого герпеса [496] Невирусные системы доставки генов [498] Активация предшественника лекарственного вещества («пролекарства») [502] Лекарственные средства на основе олигонуклеотидов [503] Синтез «антисмысловых» мРНК in vivo [504] «Антисмысловые» олигонуклеотиды как лекарственные средства [506] Олигонуклеотиды, связывающиеся с белками: антитромбиновый аптамер [508] Рибозимы как лекарственные средства [508] Коррекция генетических дефектов с помощью олигонуклеотидов [509] Заключение [510] Литература [511] Контрольные вопросы [513] ЧАСТЬ IV КОНТРОЛЬ ИССЛЕДОВАНИЙ В ОБЛАСТИ МОЛЕКУЛЯРНОЙ БИОТЕХНОЛОГИИ И ПАТЕНТОВАНИЕ БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКИХ ИЗОБРЕТЕНИЙ [515] Глава 22. Контроль применения биотехнологических методов [517] Контроль экспериментов с рекомбинантными ДНК [518] Контроль за производством и потреблением пищевых продуктов и пищевых добавок [519] Химозин [520] Триптофан [520] Бычий соматотропин [521] Контролируемое высвобождение генетически модифицированных организмов в окружающую среду [523] Pseudomonas syringae, не образующие кристаллов льда [523] Открытые полевые испытания других генетически модифицированных организмов [525] Генная терапия человека [526] Политика в области генной терапии соматических клеток [527] Накопление дефектных генов в будущих поколениях [528] Генная терапия клеток зародышевой линии [529] Клонирование человека [529] Заключение [530] Литература [531] Контрольные вопросы [532] Глава 23. Патентование биотехнологических изобретений [533] Общие вопросы патентования изобретений [534] Патентование изобретений в разных странах [536] Патентование ДНК-последовательностей [537] Патентование многоклеточных организмов [539] Патентование и фундаментальные исследования [539] Заключение [541] Литература [541] Контрольные вопросы [542] Словарь терминов [543] Предметный указатель [564] Указатель латинских названий [577] |
Формат: | djvu |
Размер: | 9443565 байт |
Язык: | RUS |
Рейтинг: | 351 |
Открыть: | Ссылка (RU) |