Методики для работ по генетической инженерии
| Автор(ы): | Мазин А. В.
06.10.2007
|
| Год изд.: | 1986 |
| Описание: | Настоящий материал издается по инициативе комплексного творческого молодежного коллектива (KMC) и написан в основном его членами. Необходимость написания такого материала связана с очень быстрым развитием методов молекулярной генетики и генетической инженерии и внедрением их во многие отрасли биологической науки. Молекулярно-генетические методы довольно трудоемки и, чтобы ими овладеть, требуются, как правило, значительные усилия и время. Предлагаемый материал был задуман как собрание кратких лаконично неписаных методичек. Для написания данного материала были привлечены квалифицированные сотрудники, имеющие опыт работы с рекомбинантными ДНК. Поэтому многие, если не большинство разделов, содержат усовершенствования или элементы оригинальных авторских разработок. |
| Оглавление: |
Обложка книги.
I. Выделение ДНК фага (?) (Блинов А. Г.) [1] II. Метод быстрого выделения плазмидной ДНК (Холодилов Н. Г.) [4] III. Выделение плазмидной ДНК центрифугированием в двухступенчатом градиенте хлористого цезия (Кузьминов А. В.) [5] A. Выращивание бактерий и амплификация плазмидной ДНК [б] Б. Получение осветленного лизата [6] B. Приготовление градиента CaCl и центрифугирование [7] ГИДРОЛИЗ ДНК ЭНДОНУКЛЕАЗАМИ РЕСТРИКЦИИ (Боровков А.Ю.) [9] ВВЕДЕНИЕ МЕТКИ В ДНК I. Введение концевой метки в ДНК (Мазин А.В.) [14] А. Введение метки в ДНК с помощью поликуклеотидкиназы фага Т4 [14] Б. Введение концевой метки в ДНК с помощью фрагмента Кленова [16] II. Ник-трансляция (Протопопов М.О.) [18] ЭЛЕКТРОФОРЕЗ ДНК (Боровков А.Ю.) [20] А. Электрофорез в агарозных гелях [20] Б. Электрофорез в акриламидных гелях [22] ТРАНСФОРМАЦИЯ E.COLI МН-1 ПЛАЗМИДНОЙ ДНК С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ХЛОРИСТОГО МАРГАНЦА (Наякшин A.M.) [27] ДЕТЕКЦИЯ РЕКОМБИНАНТНОЙ ДНК МЕТОДОМ МОЛЕКУЛЯРНОЙ ГИБРИДИЗАЦИИ (Кузнеделов К.Д.) [30] A. Перенос на фильтры небольшого количества бактериальных колоний [31] Б. Перенос на фильтры большого количества бактериальных колоний [32] B. Перенос на фильтры бляшек бактериофага (?) [33] Г. Амплификация бактериофага (?) in situ [34] Д. Подготовка фильтров для гибридизации [35] Е. Гибридизация ДНК, иммобилизованной на фильтрах,с меченными зондами [36] ОПРЕДЕЛЕНИЕ НУКЛЕОТИДНОЙ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ ДНК I.Метод определения первичной структуры ДНК до Максаму-Гилберту (Мазин А.Б.) [40] А. Элюция фрагментов ДНК из геля путем дифузии в буфер [40] Б. Химические реакции расщепления ДНК [41] II. Определение первичной структуры ДНК методом Мэксама-Гилберта с использованием ацетонового осаждения (Холодилов Н.Г.) [45] А. Электроэлюция ДНК из полиакриламидного геля [46] В. Химические реакции расщепления ДНК [46] I. Метод определения нуклеотидной последовательности ДНК по Максаму-Гилберту на твердой фазе (Федоров С.П.) [48] А. Электроэлюция ДНК из геля на DEAE- целлюлозу [48] Б. Химические реакции расщепления ДНК [48] Приложение [52] Список литературы [60] |
| Формат: | djvu |
| Размер: | 301881 байт |
| Язык: | RUS |
| Рейтинг: |
149
|
| Открыть: | Ссылка (RU) |